Lonza Nucleofector細胞核轉染儀(原Amaxa Nucleofector核轉儀),利用電脈沖在細胞膜上形成小孔,使用根據細胞種類進行優(yōu)化的轉染液,通過系統(tǒng)內置的特定種類細胞轉染程序,實現(xiàn)外源物質(DNA、RNA)進入細胞質、甚至直接穿過核膜進入細胞核。
自2001年上市以來,Lonza Nucleofector憑借高效的電穿孔轉染技術,解決了哺乳動物真核細胞轉染效率低下的問題,實現(xiàn)了真核細胞高效轉染、細胞高活率、外源物質直接入核,可廣泛用于動物原代細胞、細胞系,進行懸浮細胞、貼壁細胞原位轉染、多種物質共轉染等。其轉染效率最高可達99%。
一、Lonza Nucleofector 2b細胞核轉染系統(tǒng)
即Lonza單孔細胞核轉染儀,于2001年首次推出,是Lonza核轉儀基礎型號。2b核轉儀采用100μL體系電轉杯,鋁制電極,系統(tǒng)預制數(shù)百種細胞轉染程序,可低通量進行質粒、RNA等不同底物的轉染,其應用歷史悠久,具有超過4000篇以上的引用文獻。
①提供50多種原代細胞、血液細胞、干細胞轉染試劑盒,適用于所有種類細胞系
②提供cGMP轉染試劑盒,適用于蛋白生產
③高性價比,滿足大多數(shù)實驗的基本功能需求
二、Lonza 4D-Nucleofector細胞核轉染系統(tǒng)
即Lonza 4D細胞核轉染儀,是在2b核轉儀基礎上,進行大規(guī)模改良優(yōu)化后的主力型號,功能更強大。其改良的聚合物電極,相較傳統(tǒng)鋁電極,細胞毒害小,轉染后細胞活率高,進一步提升了轉染效率。4D核轉儀,采用模塊化設計,不同功能模塊可實現(xiàn)不同通量、細胞數(shù)量、貼壁形式的轉染,使用時按需組裝。
①C模塊:Core模塊,即核心模塊,必選模塊,作為程序運行模塊,提供超過650種預置轉染程序,適用于各類原代細胞、細胞系,是組裝4D核轉儀時的必選模塊。
②X模塊:可選模塊,用于中低通量轉染的常規(guī)模塊,轉染細胞數(shù)量為2×10^4至2×10^7。提供2個電轉杯(各100μL體系)、一個16孔電轉板條(每孔20μL體系)的轉染位置,可同時獨立轉染18種細胞。滿足懸浮細胞、貼壁細胞(需要消化)的基本轉染需求,也是目前最常選用的功能模塊。
③Y模塊:可選模塊,用于中通量的貼壁細胞不消化原位轉染,提供一個24孔電轉板條(每孔350μL體系)的轉染位置,可同時獨立轉染24種貼壁細胞。適用于神經元等不適于消化的貼壁細胞,并可以在細胞任意生長時期轉染,細胞活力好,大大豐富了貼壁細胞轉染方式。
④LV模塊:可選模塊,用于單一細胞大規(guī)模流式轉染,單次轉染細胞數(shù)量高達1×10^7至2×10^9,提供手動單次進樣1mL體系電轉盤、自動連續(xù)進樣20mL體系電轉盤兩種轉染方式,可共享X模塊優(yōu)化后的轉染程序,直接線性放大細胞數(shù)量。其耗材全封閉無菌處理,操作軟件符合美國FDA 21CFR Part 11規(guī)定,可用于人T細胞以及蛋白、抗體生產等,是CRISPR基因編輯、CAR-T細胞治療的理想選擇。
⑤96孔模塊:可選模塊,即96-Well Shuttle,是高通量摸索實驗條件,進行預實驗的擴展模塊。可提供一個可拆卸的96孔轉染位置,同時設置96個不同轉染程序,5min完成條件優(yōu)化。使用時,需連接C模塊+X模塊。
三、Lonza Nucleofector細胞核轉染試劑盒
作為Lonza Nucleofector核轉儀專用試劑盒,包含細胞特異性轉染試劑、陽性對照、電極杯/電轉板條/電轉盤耗材等。根據儀器型號、細胞類型、轉染次數(shù)的差異,提供200余種選擇,滿足各類原代細胞、細胞系的轉染需求。
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