為了滿足廣大科研工作者的需求，Lonza公司于2010年底推出了革新的4D-Nucleofector細胞核轉染系統(tǒng)。全新的4D Nucleofector細胞核轉染系統(tǒng)采用模塊化設計和導電性聚合物技術，為使用者提供更加靈活的選擇和更先進的轉染性能。

1、儀器具體介紹：

4D細胞核轉染系統(tǒng)模塊化設計，由Core unit（核心單元），和X unit（X功能單元），和/或Y unit（Y功能單元）等功能單元組成，每個功能單元適合于不同的應用需求。
型號：4D
廠家：德國Lonza公司
組成：- Core unit（核心單元：為4D-Nucleofector細胞核轉染系統(tǒng)提供脈沖；
    - X unit（X單元）：支持不同規(guī)格、不同細胞數的轉染平臺；適用于在    16-孔貼壁電轉板條中的原位貼壁轉染；
    - Y unit（Y單元）——提供24-孔細胞培養(yǎng)板中的原位貼壁核轉染平臺

功能搭配：

- 核心單元和各功能單元可以平行拼接或疊放；
- 靈活地選擇和組裝4D細胞核轉染系統(tǒng)；
- 可操控軟件：實驗者根據實驗需求，可以自己設計和存儲實驗設置；
- USB接口與電腦連接：軟件升級和數據傳送，如實驗者可以通過電腦預先定義實驗設置；
- 可接駁96孔shuttle轉染儀

2、配套轉染試劑盒：

4D-Nucleofector細胞核轉染系統(tǒng)采用導電性聚合物，取代了金屬鋁離子，保證高效轉染的同時獲得高的細胞存活率。

技術專利

專利的導電性聚合物電轉杯和電轉板條
-  專利的導電性聚合物材料替代傳統(tǒng)的金屬鋁離子電極
-  克服傳統(tǒng)金屬電極釋放的金屬離子（Al3+對細胞的毒性）對轉染效果的影響。
-  提高（或維持）轉染效率的同時，保證細胞的生理特性。
-  規(guī)格：單孔電轉杯（100μl）/16孔電轉板條（20μl）/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)

品種：

  X功能單元核轉染試劑盒
-  3種細胞系轉染試劑盒：SE, SG, SF電轉液；
-  5種原代細胞轉染試劑盒：P1, P2, P3, P4, P5電轉液
-  2種優(yōu)化轉染試劑盒
Y功能單元原位貼壁核轉染試劑盒
-  原位貼壁核轉染試劑盒AD1：神經元原位貼壁轉染；
-  原位貼壁核轉染試劑盒AD2

種類：

組成：
- 細胞特異性核轉染液
- 添加劑
- pmaxGFP陽性質粒
- 單孔電轉杯（100μl）/16孔電轉板條（20μl）/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)
- 塑料吸管（與單孔電轉杯配套）

規(guī)格：多種規(guī)格，如12RCT、24RCT、32RCT、64RCT、96RCT等

3、原位核轉染技術：“原位核轉染技術”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術只能在細胞懸液中轉染的缺陷，實現了貼壁細胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進行轉染的核轉染。
2010年，Lonza推出了4D系統(tǒng)，其中利用X unit的16孔電轉板條，推出了第一個原位核轉染試劑盒；
2010年，Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉染試劑盒——96孔電轉板條。
2011年，Lonza推出了Y unit，可以直接在24孔細胞培養(yǎng)板中進行原位核轉染。

“All-in-one” Process——細胞培養(yǎng)、轉染、觀察和分析都在同一細胞培養(yǎng)板中或電轉板中實現。

分離后的原代神經元直接接種到鋪有多聚賴氨酸的24孔培養(yǎng)板中或電轉板條中。神經元細胞能貼壁培養(yǎng)多達14d，并在培養(yǎng)過程的任何時間點進行轉染或多次轉染。

優(yōu)勢：
–  可在神經元貼壁生長的任何階段進行原位核轉染或多次進行原位核轉染
–  原位轉染前、中、后，神經元都培養(yǎng)在24孔細胞培養(yǎng)板中，維持貼壁生長的生理狀態(tài)
–  唯一轉染效率最高可達70%的非病毒轉染方法
–  整個過程維持了細胞功能
–  適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析

 （1）、24孔細胞培養(yǎng)板中貼壁細胞的原位核轉染技術：4D細胞核轉染系統(tǒng)-Y功能單元